chromatography, na kilala rin bilang "chromatographic analysis", "chromatography", ay isang paraan ng paghihiwalay at pagsusuri, na may napakalawak na hanay ng mga aplikasyon sa analytical chemistry, organic chemistry, biochemistry at iba pang larangan.
Ang nagtatag ng chromatography ay isang Russian botanist na si M.Tsvetter.Noong 1906, inilathala ng Russian botanist na si Zvetter ang mga resulta ng kanyang eksperimento: Upang paghiwalayin ang mga pigment ng halaman, ibinuhos niya ang petroleum ether extract na naglalaman ng mga pigment ng halaman sa isang glass tube na naglalaman ng calcium carbonate powder at pinahiran ito ng petroleum eter mula sa itaas hanggang sa ibaba.Dahil ang iba't ibang mga pigment ay may iba't ibang mga kapasidad ng adsorption sa ibabaw ng mga particle ng calcium carbonate, sa proseso ng leaching, ang iba't ibang mga pigment ay bumababa sa iba't ibang bilis, kaya bumubuo ng mga banda ng iba't ibang kulay.Ang mga sangkap ng pigment ay pinaghiwalay.Pinangalanan niya itong separation method na chromatography.
Schematic na representasyon ng isang eksperimento sa paghihiwalay ng pigment ng dahon ng halaman
Sa patuloy na pag-unlad ng mga paraan ng paghihiwalay, parami nang parami ang walang kulay na mga sangkap na nagiging object ng paghihiwalay, unti-unting nawala ang chromatography ng kahulugan ng "kulay", ngunit ang pangalan ay ginagamit pa rin hanggang ngayon.
Pag-uuri ng Chromatographic
Ang kakanyahan ng chromatography ay isang proseso kung saan ang mga molekula na paghihiwalay ay nahahati at balanse sa pagitan ng nakatigil na yugto at ng mobile na bahagi.Ang iba't ibang mga sangkap ay nahati sa iba't ibang paraan sa pagitan ng dalawang mga yugto, na nagpapagalaw sa kanila sa iba't ibang bilis sa mobile phase.Sa paggalaw ng mobile phase, ang iba't ibang bahagi sa halo ay pinaghihiwalay sa isa't isa sa nakatigil na yugto.Depende sa mekanismo, maaari itong nahahati sa iba't ibang mga kategorya.
1, ayon sa dalawang-phase pisikal na pag-uuri ng estado
Mobile phase: Gas chromatography, liquid chromatography, supercritical fluid chromatography
Nakatigil na yugto: gas-solid, gas-liquid;Liquid-solid, liquid-liquid
2, ayon sa anyo ng pag-uuri ng nakatigil na bahagi
Column chromatography: packed column chromatography, capillary column chromatography, micropacked column chromatography, preparative chromatography
Plane chromatography: paper chromatography, thin layer chromatography, polymer membrane chromatography
3, inuri ayon sa mekanismo ng paghihiwalay
Adsorption chromatography: Ang iba't ibang bahagi ay pinaghihiwalay ayon sa kanilang adsorption at desorption capacities sa adsorbents
Partition chromatography: Ang iba't ibang bahagi ay pinaghihiwalay ayon sa kanilang solubility sa solvent
Molecular exclusion chromatography: ayon sa laki ng molecular size ng separation ln ion exchange chromatography: iba't ibang bahagi ng affinity para sa ion-exchange resin separation
Affinity chromatography: Paghihiwalay gamit ang pagkakaroon ng isang partikular na affinity sa pagitan ng biological macromolecules
Capillary electrophoresis: ang mga bahagi ay pinaghiwalay ayon sa mga pagkakaiba sa mobility at/o partition behavior
Ang chiral chromatography ay ginagamit para sa paghihiwalay at pagsusuri ng mga chiral na gamot, na maaaring nahahati sa tatlong kategorya: chiral derivatization reagent method;Chiral mobile phase additive method;Chiral stationary phase resolution method
Pangunahing terminolohiya para sa chromatography
Ang mga kurba na nakuha sa pamamagitan ng pag-plot ng mga signal ng tugon ng mga bahagi pagkatapos ng pagtuklas ng chromatographic separation laban sa oras ay tinatawag na chromatograms.
Baseline:Sa ilalim ng ilang partikular na kundisyon ng chromatographic, ang kurba ng signal na nabuo kapag ang mobile phase lamang ang dumadaan sa detector system ay tinatawag na baseline, tulad ng ipinapakita sa ot line.Kapag ang pang-eksperimentong kundisyon ay stable, ang baseline ay isang linya na parallel sa pahalang na axis.Sinasalamin ng baseline ang ingay ng instrumento, pangunahin ang detector, sa paglipas ng panahon.
Pinakamataas na taas:ang patayong distansya sa pagitan ng chromatographic peak point at ng baseline, na tinutukoy ng h, tulad ng ipinapakita sa linya ng AB.
Lapad ng rehiyon:Ang lapad ng rehiyon ng chromatographic peak ay direktang nauugnay sa kahusayan ng paghihiwalay.May tatlong paraan para ilarawan ang chromatographic peak width: standard deviation σ, peak width W, at FWHM W1/2.
Standard deviation (σ):Ang σ ay ang kalahating distansya sa pagitan ng dalawang inflection point sa normal na distribution curve, at ang halaga ng σ ay nagpapahiwatig ng antas ng dispersion ng mga bahagi palayo sa column.Kung mas malaki ang halaga ng σ, mas nakakalat ang mga bahagi ng effluent, at mas malala ang epekto ng paghihiwalay.Sa kabaligtaran, ang mga bahagi ng effluent ay puro at ang epekto ng paghihiwalay ay mabuti.
Peak na lapad W:Ang mga intersection point sa magkabilang panig ng chromatographic peak ay ginagamit bilang tangent lines, at ang intercept sa baseline ay tinatawag na peak width, o baseline width, na maaari ding ipahayag bilang W, tulad ng ipinapakita sa Figure IJ.Ayon sa prinsipyo ng normal na distribusyon, ang ugnayan sa pagitan ng peak width at standard deviation ay mapapatunayang W=4σ.
W1/2:Ang peak width sa kalahati ng peak height ay tinatawag na FWHM, gaya ng ipinapakita para sa layo ng GH.W1/2=2.355σ, W=1.699W1/2.
Ang W1/2, W ay parehong hinango sa σ at ginagamit upang kalkulahin ang mga peak area bilang karagdagan sa pagsukat sa epekto ng column.Ang pagsukat ng FWHM ay mas maginhawa at pinakakaraniwang ginagamit.
maikling buod
Mula sa chromatographic peak outflow curve, maaaring makamit ang mga sumusunod na layunin:
a, Ang pagsusuri ng husay ay isinagawa batay sa halaga ng pagpapanatili ng mga chromatographic peak
b, quantitative analysis batay sa lugar o peak ng chromatographic peak
C. Sinuri ang kahusayan sa paghihiwalay ng column ayon sa halaga ng pagpapanatili at lapad ng peak ng chromatographic peak
Ang formula ng pagkalkula na kasangkot sa chromatography
1. Halaga ng pagpapanatili
Ang halaga ng pagpapanatili ay isang parameter na ginagamit upang ilarawan ang antas kung saan napapanatili ang isang sample na bahagi sa column at ginagamit bilang isang indicator ng chromatographic characterization.Ang pamamaraan ng representasyon nito ay ang mga sumusunod:
Oras ng pagpapanatili tR
Oras ng kamatayantM
Ayusin ang oras ng pagpapanatili tR'=tR-tM
(Kabuuang oras na ginugol sa nakatigil na yugto)
Dami ng pagpapanatili
VR=tR*F.(independent sa bilis ng mobile phase)
Patay volume
VM=tM*Fc
(Ang puwang na hindi inookupahan ng nakatigil na bahagi sa daloy ng daloy mula sa injector patungo sa detektor)
Ayusin ang dami ng pagpapanatili ng VR'=t'R*Fc
2. Relatibong halaga ng pagpapanatili
Ang relative retention value, na kilala rin bilang separation factor, partition coefficient ratio o relative capacity factor, ay ang ratio ng adjusted retention time (volume) ng nasubok na component sa adjusted retention time (volume) ng standard sa ilalim ng ilang partikular na chromatographic na kundisyon.
Ginamit ang mga relatibong halaga ng pagpapanatili upang maalis ang impluwensya ng ilang partikular na kundisyon sa pagpapatakbo, gaya ng rate ng daloy at pagkawala ng fixative, sa mga halaga ng pagpapanatili.Ang pamantayan sa kaugnay na halaga ng pagpapanatili ay maaaring isang bahagi sa nasubok na sample o isang tambalang idinagdag na artipisyal.
3. Retention index
Ang retention index ay ang retention index ng substance i na susuriin sa isang fixed solution X. Dalawang n-alanes ang pinipili bilang reference substance, ang isa ay may N carbon number at ang isa ay may N+n.Ang kanilang adjusted retention time ay t 'r (N) at t 'r (N+n), ayon sa pagkakabanggit, upang ang adjusted retention time t 'r (i) ng substance i na susuriin ay eksaktong nasa pagitan nila, iyon ay, t 'r (N).
Ang index ng pagpapanatili ay maaaring kalkulahin bilang mga sumusunod.
4. Salik ng kapasidad (k)
Sa equilibrium, ang ratio ng masa ng isang bahagi sa nakatigil na bahagi (s) sa mobile phase (m), na tinatawag na capacity factor.Ang formula ay ang mga sumusunod:
5、Partition coefficient (K) Sa equilibrium, ang ratio ng konsentrasyon ng isang bahagi sa stationary phase (s) sa mobile phase (m), na tinatawag na partition coefficient.Ang formula ay ang mga sumusunod
Ang kaugnayan sa pagitan ng K at k:
Sinasalamin nito ang uri ng hanay at ang buhol nitong mahahalagang katangian ng istraktura
maikling buod
Relasyon sa pagitan ng halaga ng pagpapanatili at kadahilanan ng kapasidad at koepisyent ng partisyon:
Ang Chromatographic separation ay batay sa pagkakaiba sa kakayahan ng adsorption o dissolution ng bawat component sa isang fixed relative sample, na maaaring ipahayag sa dami ng laki ng partition coefficient K (o capacity factor k) value.
Ang mga sangkap na may malakas na adsorption o dissolution na kakayahan ay may malaking partition coefficient (o capacity factor) at mahabang panahon ng pagpapanatili.Sa kabaligtaran, ang mga sangkap na may mahinang adsorption o solubility ay may maliit na partition coefficient at isang maikling oras ng pagpapanatili.
Pangunahing teorya ng chromatography
1. Teorya ng tray
(1) Ilagay -- thermodynamic theory
Nagsimula ito sa modelo ng tower plate na iminungkahi nina Martin at Synge.
Fractionating column: sa tray para sa ilang beses ng gas-liquid equilibrium, ayon sa boiling point ng iba't ibang paghihiwalay.
Column: Ang mga bahagi ay binabalanse ng maraming partition sa pagitan ng dalawang phase at pinaghihiwalay ayon sa iba't ibang partition coefficient.
(2) Hypothesis
(1) Maraming mga tray sa column, at ang mga bahagi ay maaaring mabilis na maabot ang distribution equilibrium sa loob ng tray interval (iyon ay, ang taas ng tray).
(2) Ang mobile phase ay pumapasok sa column, hindi tuluy-tuloy ngunit pumipintig, iyon ay, ang bawat sipi ay isang volume ng column.
(3) Kapag ang sample ay idinagdag sa bawat column plate, ang diffusion ng sample kasama ang column axis ay maaaring mapabayaan.
(4) Ang partition coefficient ay pantay sa lahat ng trays, independiyente sa dami ng mga bahagi.Ibig sabihin, pare-pareho ang partition coefficient sa bawat taban.
(3) Prinsipyo
Schematic diagram ng tray theory
Kung ang isang bahagi ng unit mass, katulad m=1 (halimbawa, 1mg o 1μg), ay idinagdag sa No. 0 tray, at pagkatapos ng distribution equilibrium, dahil k=1, namely ns=nm, nm=ns=0.5.
Kapag ang dami ng plate (lΔV) ng carrier gas ay pumasok sa plate 0 sa anyo ng pulsation, ang carrier gas na naglalaman ng nm component sa gas phase ay itinutulak sa plate 1. Sa oras na ito, ang ns component sa liquid phase ng plate 0 at ang bahagi ng nm sa gas phase ng plate 1 ay muling ipapamahagi sa pagitan ng dalawang phase.Samakatuwid, ang kabuuang halaga ng mga sangkap na nakapaloob sa plate 0 ay 0.5, kung saan ang gas at likidong mga phase ay bawat 0.25, at ang kabuuang halaga na nilalaman sa plate 1 ay 0.5 din.Ang mga phase ng gas at likido ay 0.25 din.
Ang prosesong ito ay paulit-ulit sa bawat oras na ang isang bagong plate volume carrier gas ay pumipintig sa column (tingnan ang talahanayan sa ibaba).
(4)Chromatographic outflow curve equation
σ ay ang karaniwang paglihis, ay ang oras ng pagpapanatili, C ay ang konsentrasyon sa anumang oras,
C, ay ang konsentrasyon ng iniksyon, iyon ay, ang kabuuang halaga ng mga bahagi (peak area A).
(5) mga parameter ng kahusayan ng haligi
Sa isang pare-parehong tR, mas maliit ang W o w 1/2 (iyon ay, ang mas makitid na rurok), mas malaki ang bilang ng mga teoretikal na plato n, mas maliit ang teoretikal na taas ng plato, at mas mataas ang kahusayan sa paghihiwalay ng haligi.Ang parehong ay totoo sa epektibong teorya tray neff.Samakatuwid, ang teoretikal na bilang ng mga tray ay isang index upang suriin ang kahusayan ng mga haligi.
(5) Mga katangian at pagkukulang
> Mga kalamangan
Ang teorya ng tray ay semi-empirical at ipinapaliwanag ang hugis ng outflow curve
Ang mga proseso ng pagkahati at paghihiwalay ng mga bahagi ay inilalarawan
Ang isang index upang suriin ang kahusayan ng hanay ay iminungkahi
> Mga Limitasyon
Hindi talaga maaabot ng mga bahagi ang balanse ng pamamahagi sa dalawang yugto:
Ang longitudinal diffusion ng mga bahagi sa column ay hindi maaaring balewalain:
Ang impluwensya ng iba't ibang mga kinetic na kadahilanan sa proseso ng paglipat ng masa ay hindi isinasaalang-alang.
Ang kaugnayan sa pagitan ng epekto ng haligi at bilis ng daloy ng mobile phase ay hindi maipaliwanag:
Hindi malinaw kung anong mga pangunahing salik ang nakakaapekto sa epekto ng column
Ang mga problemang ito ay kasiya-siyang nalutas sa teorya ng rate.
2. Teorya ng rate
Noong 1956, ang Dutch scholar na si VanDeemter et al.hinihigop ang konsepto ng teorya ng tray, at pinagsama ang mga kinetic na kadahilanan na nakakaapekto sa taas ng tray, inilagay ang kinetic theory ng chromatographic process - rate theory, at nagmula sa VanDeemter equation.Isinasaalang-alang nito ang proseso ng chromatographic bilang isang dinamikong proseso na hindi balanse at pinag-aaralan ang impluwensya ng mga kinetic na salik sa peak broadening (ibig sabihin, epekto ng column).
Nang maglaon, sina Giddings at Snyder et al.iminungkahi ang liquid chromatography rate equation (ibig sabihin, Giddings equation) batay sa VanDeemter equation (na kalaunan ay tinawag na gas chromatography rate equation) at ayon sa property difference sa pagitan ng liquid at gas.
(1) Van Deemter equation
Saan: H: ang taas ng pisara
A: koepisyent ng eddy diffusion term
B: koepisyent ng molecular diffusion term
C: koepisyent ng termino ng paglaban sa paglipat ng masa
(2) Giddings equation
Quantitative at qualitative analysis
(1) Qualitative analysis
Ang qualitative chromatographic analysis ay upang matukoy ang mga compound na kinakatawan ng bawat chromatographic peak.Dahil ang iba't ibang substance ay may mga tiyak na halaga ng pagpapanatili sa ilalim ng ilang partikular na chromatographic na kundisyon, ang retention value ay maaaring gamitin bilang isang qualitative index.Kasalukuyang nakabatay sa mga halaga ng pagpapanatili ang iba't ibang chromatographic qualitative na pamamaraan.
Gayunpaman, ang iba't ibang mga sangkap ay maaaring may magkatulad o magkaparehong mga halaga ng pagpapanatili sa ilalim ng parehong mga kondisyon ng chromatographic, iyon ay, ang mga halaga ng pagpapanatili ay hindi eksklusibo.Kaya't mahirap ilarawan ang isang ganap na hindi kilalang sample batay sa mga halaga ng pagpapanatili lamang.Kung sa batayan ng pag-unawa sa pinagmulan, kalikasan at layunin ng sample, ang isang paunang paghatol sa komposisyon ng sample ay maaaring gawin, at ang mga sumusunod na pamamaraan ay maaaring gamitin upang matukoy ang tambalang kinakatawan ng chromatographic peak.
1. Qualitative control gamit ang mga purong substance
Sa ilalim ng ilang partikular na chromatographic na kundisyon, ang isang hindi alam ay may tinukoy lamang na oras ng pagpapanatili.Samakatuwid, ang hindi alam ay maaaring matukoy nang husay sa pamamagitan ng paghahambing ng oras ng pagpapanatili ng kilalang purong sangkap sa ilalim ng parehong mga kundisyong chromatographic sa oras ng pagpapanatili ng hindi kilalang sangkap.Kung ang dalawa ay pareho, ang hindi kilalang sangkap ay maaaring isang kilalang purong sangkap;Kung hindi, ang hindi alam ay hindi ang purong sangkap.
Ang paraan ng pagkontrol ng dalisay na substansiya ay naaangkop lamang sa hindi kilalang sangkap na ang komposisyon ay kilala, na ang komposisyon ay medyo simple, at kung saan ang purong sangkap ay kilala.
2. Relative retention value method
Ang kamag-anak na halaga ng pagpapanatili α, ay tumutukoy sa pagsasaayos sa pagitan ng bahagi i at mga reference na materyales Ratio ng mga halaga ng pagpapanatili:
Nagbabago lamang ito sa pagbabago ng temperatura ng fixative at column, at walang kinalaman sa iba pang kondisyon ng operating.
Sa isang tiyak na nakatigil na yugto at temperatura ng haligi, ang mga naayos na halaga ng pagpapanatili ng sangkap i at reference substance s ay sinusukat ayon sa pagkakabanggit, at pagkatapos ay kinakalkula ayon sa formula sa itaas.Ang nakuhang mga relatibong halaga ng pagpapanatili ay maaaring kumpara sa mga katumbas na halaga sa panitikan.
3, pagdaragdag ng mga kilalang sangkap upang madagdagan ang peak height method
Kapag maraming bahagi sa hindi kilalang sample, ang nakuhang mga chromatographic peak ay masyadong siksik upang madaling matukoy ng pamamaraan sa itaas, o kapag ang hindi kilalang sample ay ginagamit lamang para sa tinukoy na pagsusuri ng item.
"Una ang isang chromatogram ng isang hindi kilalang sample ay ginawa, at pagkatapos ay isang karagdagang chromatogram ay nakuha sa pamamagitan ng pagdaragdag ng isang kilalang sangkap sa hindi kilalang sample."Ang mga bahagi na may mas mataas na taas ng tuktok ay maaaring kilala para sa mga naturang sangkap.
4. Panatilihin ang husay na pamamaraan ng index
Kinakatawan ng retention index ang retention behavior ng mga substance sa fixatives at sa kasalukuyan ay ang pinakamalawak na ginagamit at kinikilala sa buong mundo na qualitative index sa GC.Ito ay may mga pakinabang ng mahusay na reproducibility, pare-parehong pamantayan at maliit na koepisyent ng temperatura.
Ang index ng pagpapanatili ay nauugnay lamang sa mga katangian ng nakatigil na yugto at temperatura ng column, ngunit hindi sa iba pang mga kundisyong pang-eksperimento.Ang katumpakan at reproducibility nito ay mahusay.Hangga't ang temperatura ng haligi ay kapareho ng sa nakatigil na yugto, ang halaga ng panitikan ay maaaring ilapat para sa pagkakakilanlan, at hindi kinakailangang gamitin ang purong materyal para sa paghahambing.
(2)Pagsusuri ng dami
Batayan para sa chromatographic quantification:
Ang gawain ng quantitative analysis ay upang mahanap ang daan ng mga bahagi sa pinaghalong sample
Fractional na nilalaman.Ang Chromatographic quantification ay batay sa mga sumusunod: kapag ang mga kondisyon ng operating ay pare-pareho, ay
Ang masa (o konsentrasyon) ng sinusukat na bahagi ay tinutukoy ng signal ng pagtugon na ibinigay ng detector
Ito ay proporsyonal.Namely:
Batayan para sa chromatographic quantification:
Ang gawain ng quantitative analysis ay upang mahanap ang daan ng mga bahagi sa pinaghalong sample
Fractional na nilalaman.Ang Chromatographic quantification ay batay sa mga sumusunod: kapag ang mga kondisyon ng operating ay pare-pareho, ay
Ang masa (o konsentrasyon) ng sinusukat na bahagi ay tinutukoy ng signal ng pagtugon na ibinigay ng detector
Ito ay proporsyonal.Namely:
1. Paraan ng pagsukat ng peak area
Ang peak area ay ang pangunahing quantitative data na ibinibigay ng mga chromatograms, at ang katumpakan ng peak area measurement ay direktang nakakaapekto sa quantitative na mga resulta.Iba't ibang paraan ng pagsukat ang ginamit para sa mga chromatographic peak na may iba't ibang hugis ng peak.
Mahirap hanapin ang eksaktong halaga ng taglamig sa quantitative analysis:
Sa isang banda dahil sa kahirapan ng tumpak na pagsukat ng ganap na dami ng iniksyon: sa kabilang banda
Nakadepende ang peak area sa mga kondisyon ng chromatographic, at dapat panatilihin ang chromatographic strip kapag sinusukat ang value.
Hindi posible o maginhawang gawin ang parehong bagay.At kahit na maaari mong makuha ito ng tama
Ang eksaktong halaga, dahil din sa walang pinag-isang pamantayan at hindi direktang mailalapat.
2.Quantitative correction factor
Kahulugan ng quantitative correction factor: dami ng mga bahagi na pumapasok sa detector (m)
Ang ratio ng chromatographic peak area nito (A) o peak height () ay isang proportionality constant (,
Ang proportionality constant ay tinatawag na absolute correction factor para sa component.
Mahirap hanapin ang eksaktong halaga ng taglamig sa quantitative analysis:
Sa isang banda dahil sa kahirapan ng tumpak na pagsukat ng ganap na dami ng iniksyon: sa kabilang banda
Nakadepende ang peak area sa mga kondisyon ng chromatographic, at dapat panatilihin ang chromatographic strip kapag sinusukat ang value.
Hindi posible o maginhawang gawin ang parehong bagay.At kahit na maaari mong makuha ito ng tama
Ang eksaktong halaga, dahil din sa walang pinag-isang pamantayan at hindi direktang mailalapat.
Ibig sabihin, ang relative correction factor 'ng isang component ay ang component at ang reference material s
Ang ratio ng ganap na mga kadahilanan ng pagwawasto.
Makikita na ang relative correction factor ay kapag ang kalidad ng component kumpara sa standard.
Kapag ang substance s ay pantay, ang peak area ng reference material ay ang peak area ng component
Maramihan.Kung ang ilang bahagi ay may mass m at peak area A, kung gayon ang bilang ng f'A
Ang mga value ay katumbas ng peak area ng reference material na may mass na.Sa ibang salita,
Sa pamamagitan ng relative correction factor, ang mga peak area ng bawat component ay maaaring paghiwalayin
Na-convert sa peak area ng reference na materyal na katumbas ng masa nito, pagkatapos ay ang ratio
Ang pamantayan ay pinag-isa.Kaya ito ang normalized na paraan upang malaman ang porsyento ng bawat bahagi
Ang batayan ng dami.
Paraan ng pagkuha ng relative correction factor: ang relative correction factor values ay inihambing lamang sa pagiging
Ang pagsukat ay nauugnay sa pamantayan at uri ng detektor, ngunit sa strip ng operasyon
Hindi mahalaga.Samakatuwid, ang mga halaga ay maaaring makuha mula sa mga sanggunian sa panitikan.Kung ang text
Kung hindi mo mahanap ang nais na halaga sa alok, maaari mo ring matukoy ito nang mag-isa.Paraan ng pagpapasiya
Paraan: Isang tiyak na halaga ng sinusukat na sangkap sampung napiling materyal na sanggunian → ginawa sa isang tiyak na konsentrasyon
Ang chromatographic peak area A at As ng dalawang bahagi ay sinusukat.
Yan ang formula.
3. Paraan ng pagkalkula ng dami
(1) Paraan ng normalisasyon ng lugar
Ang kabuuan ng nilalaman ng lahat ng peak-free fraction ay kinakalkula bilang 100% para sa quantification
Ang pamamaraan ay tinatawag na normalisasyon.Ang formula ng pagkalkula nito ay ang mga sumusunod:
Kung saan ang P,% ay ang porsyento ng nilalaman ng mga nasubok na bahagi;A1, A2... Ang A n ay bahagi 1. Ang peak area ng 1~n;f'1, f'2... f'n ay ang relative correction factor para sa mga bahagi 1 hanggang n.
(2) panlabas na karaniwang pamamaraan
Ang paraan ng quantitative comparison sa pagitan ng response signal ng component na susuriin sa sample at ang pure component na susuriin bilang control.
(3) Panloob na pamantayang pamamaraan
Ang tinatawag na panloob na pamantayang pamamaraan ay isang pamamaraan kung saan ang isang tiyak na halaga ng purong sangkap ay idinagdag sa karaniwang solusyon ng nasubok na sangkap at ang sample na solusyon bilang isang panloob na pamantayan, at pagkatapos ay sinuri at tinutukoy.
(3) karaniwang paraan ng karagdagan
Ang karaniwang paraan ng pagdaragdag, na kilala rin bilang paraan ng panloob na pagdaragdag, ay upang magdagdag ng isang tiyak na halaga ng (△C)
Ang reference ng test substance ay idinagdag sa sample solution na susuriin, at ang pagsubok ay idinagdag sa assay
Ang peak ng sample solution pagkatapos ng substance ay mas mataas kaysa sa orihinal na sample solution
Ang pagtaas ng lugar (△A) ay ginamit upang kalkulahin ang konsentrasyon ng sangkap sa sample na solusyon
Nilalaman (Cx)
Kung saan ang Ax ay ang peak area ng substance na susukatin sa orihinal na sample.
Oras ng post: Mar-27-2023